参照国家标准GB/T 23527-2009测定蛋白酶活力，稍作修改。先将1%的酪蛋白溶液于40℃水浴5 min。加稀释3.5倍的胰蛋白酶溶液0.5 mL，于40℃水浴2 min后，加1%的酪蛋白溶液0.5 mL，混匀，然后在40℃下水浴反应10 min，结束后加入1.0 mL三氯乙酸。空白先加三氯乙酸再加酪蛋白。静置10 min，12000 r/min离心5 min，取滤液30 μL，碳酸钠溶液150 μL，福林酚试剂30 μL，40℃恒温20 min，680 nm下于酶标仪测吸光值。每个样品做3次平行。

量取胰蛋白酶溶液48 mL，将超声波发生仪的探头置于溶液中，探头没过溶液2 cm，不接触溶液底部。超声参数：间歇比（s）3:3，超声总时间5 min，超声功率范围（75~350 W），初始温度控制为25℃。超声预处理完毕后于4℃冰箱放置12 h，测其酶活、热稳定性、动力学、热力学、荧光光谱、紫外光谱和红外光谱。

由于反应物酪蛋白减少量不易测定，因此用产物酪氨酸生成量的变化来反映水解过程

胰蛋白酶活性随超声功率的变化曲线如图1所示。胰蛋白酶活性随着超声功率的增加出现波动现象。除了300 W和350 W时，其余超声功率对胰蛋白酶活性提高都有显著差异。其中在250 W时，胰蛋白酶活性最高，依次是125 W和175 W。酶活性比未超声处理的酶活性依次提高26.9%，25.3%和22.2%。

注意：本次使用的超声波细胞粉碎机为昆山超声仪器有限公司生产的昆山舒美KBS-150数控超声细胞粉碎机。